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番茄叶片液泡转化酶基因植物反义表达载体的构建与瞬时表达

番茄叶片液泡转化酶基因植物反义表达载体的构建与瞬时表达

作     者:程智慧 吴正景 孟焕文 许小勇 CHENG Zhi-hui;WU Zheng-jing;MENG Huan-wen;XU Xiao-yong

作者机构:西北农林科技大学园艺学院 河南科技大学林学院河南洛阳471003 

基  金:国家自然科学基金项目(30370977) 国家"十五"科技攻关项目(2004 BA 516A09) 

出 版 物:《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 (Journal of Northwest A&F University(Natural Science Edition))

年 卷 期:2007年第35卷第4期

页      码:155-158页

摘      要:在分析植物液泡转化酶基因保守区序列的基础上,设计1对PCR引物,以番茄(中蔬四号)叶片总RNA的反转录产物为模板,扩增出长为668 bp的cDNA片段,并克隆入pMD-18 T simple载体。测序结果表明,所获得的片段为番茄液泡转化酶基因TIV1的片段;PCR和酶切分析表明,该片段已成功定向连入到双无载体pBinAR的CaMV 35S启动子和OCS终止子间,构建成反义植物表达载体pBinAR-aTIV1;菌落PCR表明质粒成功转化入农杆菌EHA105;瞬时表达证明该反义片段对番茄叶片液泡转化酶活性具有明显的抑制效果。

主 题 词:番茄 液泡转化酶 反转录PCR 反义表达载体构建 瞬时表达 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 0902[农学-自然保护与环境生态类] 090102[090102] 090202[090202] 

核心收录:

D O I:10.3321/j.issn:1671-9387.2007.04.034

馆 藏 号:203134720...

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