四数獐牙菜ISSR-PCR反应体系的正交优化

作     者：杨路存 陈桂琛 周国英 宋文珠 李春丽 许璟瑛 Yang Lucun;Chen Guichen;Zhou Guoying;Song Wenzhu;Li Chunli;Xu Jingying

作者机构：中国科学院西北高原生物研究所西宁810001 中国科学院研究生院北京100039 

基　　金：国家中西部专项项目(2001BA901A47) 

出 版 物：《生物技术通报》 (Biotechnology Bulletin)

年 卷 期：2010年第26卷第9期

页      码：123-128页

摘      要：采用正交试验与单因素设计相结合的方法,对四数獐牙菜ISSR-PCR反应体系中的4种主要因素(Mg2+、TaqDNA聚合酶、dNTP及引物)进行优化筛选,PCR结果用统计软件SPSS16.0分析。结果显示,Mg2+、TaqDNA聚合酶、dNTP这3因素的不同水平对PCR反应结果都有显著影响,其中Mg2+的浓度影响最大。筛选出各反应因素的最佳水平,建立四数獐牙菜ISSR-PCR反应的最佳体系(25μL)为3.0 mmol/L Mg2+,250μmol/L dNTP,0.6μmol/L引物,1UTaqDNA聚合酶,40 ngDNA,2.5μL10×buffer。这一体系的建立为今后利用ISSR技术进行四数獐牙菜遗传多样性分析以及物种保护奠定了技术基础。

主 题 词：四数獐牙菜 ISSR-PCR 正交设计 体系优化 

学科分类：1008[医学-中药学类] 1006[医学-中西医结合类] 100602[100602] 10[医学] 

D　O　I：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2010.09.043

馆 藏 号：203134853...