RNA干扰趋化因子受体4基因表达对神经母细胞瘤体外侵袭能力的影响

作     者：陈鑫 董蒨 鹿洪亭 郝希伟 邢士超 CHEN Xin;DONG Qian;LU Hong-ting;HAO Xi-wei

作者机构：青岛大学医学院附属医院小儿外科266003 青岛大学医学院附属医院中心实验室266003 

基　　金：国家自然科学基金资助(编号:30872702) 2007年青岛市科技发展计划(编号:07-2-15-nsh) 

出 版 物：《中华小儿外科杂志》 (Chinese Journal of Pediatric Surgery)

年 卷 期：2011年第32卷第4期

页      码：285-289页

摘      要：目的构建趋化因子受体4（Q（cR4）小分子干扰RNA（siRNA）表达载体，研究其对体外神经母细胞瘤侵袭能力的影响。方法选择CXCR4高表达的神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞系，设计合成人CXCR4基因不同靶点的能编码siRNA的3条双链DNA序列，克隆到真核表达载体pSilencer^TMneo中构建siRNA表达载体，体外脂质体介导转染SH-SY5Y细胞，用半定量RT-TCR分析CXCR4基因mRNA的变化，用免疫组织化学和Westernblot分析CXCR4蛋白表达，Transwell小室检测细胞的侵袭能力。结果成功构建了CXCR4-siRNA表达载体，转染后半定量RT-PCR检测神经母细胞瘤细胞CXCR4mRNA丰度分别为siR1转染组0．32±0．09、siR2转染组0．35±0．13和siR3转染组0．33±0．11，相对于对照组0．58±0．13表达下降（P〈0．05）；转染后免疫组化检测神经母细胞瘤细胞CXCR4的蛋白表达分别为siR1转染组75．98±4．81、siR2转染组75．52±3．95和siR3转染组76．35±6．51，相对于对照组92．196±3．89表达下降（P〈0．01）；转染后Western blot检测神经母细胞瘤细胞CXCR4的蛋白表达分别为siRl转染组0．1103±0．0023、siR2转染组0．1203±0．0015和siR3转染组0．1308±0．0018，相对于对照组0．4832±0．0012表达下降（P〈0．01）；且转染后神经母细胞瘤细胞侵袭能力较对照组53．11±3．72降低（P〈0．05），siR1转染组为25．48±2．81、siR2转染组为30．89±2．77、siR3转染组为18．83±1．79。结论CXCR4-siRNA表达载体通过降低CXCR4基因的蛋白表达能显著抑制神经母细胞瘤细胞的体外侵袭能力，有望为神经母细胞瘤的基因治疗开辟新途径。

主 题 词：受体,趋化因子 RNA干扰 神经母细胞瘤 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.0253-3006.2011.04.013

馆 藏 号：203134879...