幽门螺旋杆菌尿素酶A亚基抗原表位肽与霍乱毒素B亚基融合蛋白的生物信息学设计及表达优化研究(英文)

作     者：郭乐 刘昆梅 李小康 汤锋 奚涛 

作者机构：宁夏医科大学检验学院银川750021 中国药科大学生命科学与技术学院南京210009 

基　　金：Supported by the Science Foundation of China Pharmaceutical University(JKY2009023) Postgraduate Innovation Project of Jiangsu Province(CXZZ11_0817) National Major Special Program of New Drug Research and Development(2012ZX09103-301-008) 

出 版 物：《生物技术进展》 (Current Biotechnology)

年 卷 期：2013年第3卷第1期

页      码：38-44页

摘      要：幽门螺旋杆菌(Hp)是慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌的重要致病因子。研发基于Hp尿素酶的表位疫苗是一种很有前景的防治Hp感染的策略。本研究主要通过生物信息学软件对Hp尿素酶表位肽U21和霍乱毒素B亚基(CTB)的连接顺序和间隔序列加以分析,设计出一种由U21和CTB构成的Hp表位疫苗CTB-UA。通过基因克隆技术构建含有融合基因CTB-UA的重组表达载体pETCUA及其重组菌株;重组菌株经经蛋白表达和优化后,利用Ni-NTP镍离子亲和层析和DEAESepharoseFF阴离子交换层析纯化融合蛋白CTB-UA,获得高纯度(94.8%)的融合蛋白CTB-UA。并进一步通过腹腔注射免疫BALB/c小鼠,鉴定Hp表位疫苗CTB-UA的免疫学活性,经间接ELISA鉴定小鼠能够产生针对CTB和表位肽U21的高滴度特异性抗体。结果证明,Hp表位疫苗CTB-UA具有科学合理的结构,能在大肠杆菌表达系统中获得较高水平的表达,且具有较高的免疫学特异性,为研发防治Hp感染的表位疫苗奠定一定的实验基础。

主 题 词：幽门螺旋杆菌 尿素酶 表位 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100102[100102] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.2095-2341.2013.01.08

馆 藏 号：203134972...