新型抗体结合蛋白CBD-SPG的设计与表达

作     者：马军 周海燕 陈蕴 段作营 龚笑海 金坚 MA Jun;ZHOU Hai-yan;CHEN Yun;DUAN Zuo-ying;GONG Xiao-hai;JIN Jian

作者机构：江南大学工业生物技术教育部重点实验室 江南大学药学院江苏无锡214122 

出 版 物：《工业微生物》 (Industrial Microbiology)

年 卷 期：2014年第44卷第2期

页      码：37-41页

摘      要：设计并表达可用于纯化IgG的新型高载量抗体结合蛋白CBD-SPG。利用基因重组技术将纤维素结合结构域(Cellulose Binding Domain,CBD)基因插入到表达载体pET28a-SPG中,获得重组质粒pET28a-CBD-SPG,并转化大肠杆菌BL21(DE3)。IPTG诱导CBD-SPG融合蛋白表达,并用SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行鉴定。重组表达质粒pET28a-CBD-SPG经双酶切及测序验证元误;表达产物经SDS-PAGE和Western Blot分析表明融合蛋白的表观分子量约为40kD;CBDSPG具有良好的结合纤维素和抗体的能力,晶体纤雏素Avicel ph101对CBD-SPG的载量可达11.6l mg/g(w/w)。成功构建并运用原核系统表达CBD-SPG;CBD-SPG在保持良好抗体结合能力的同时,更具有了结合纤维素的能力,有望成为一种新型的亲和材料。

主 题 词：纤维素结合结构域 蛋白G 纯化抗体 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1001-6678.2014.02.007

馆 藏 号：203135196...