猪腹泻相关病毒多重RT-PCR检测方法的建立

作     者：吴洋 杜彩虹 张博 唐丽杰 乔薪瑗 姜艳平 李一经 WU Yang;DU Cai-hong;ZHANG Bo;TANG Li-jie;QIAO Xin-yuan;JIANG Yan-ping;LI Yi-jing

作者机构：东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030 

基　　金："十二五"国家863计划(2012AA101304-3) 黑龙江省教育厅项目(10543006) 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2014年第36卷第5期

页      码：376-378页

摘      要：为建立同时检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪轮状病毒(PRV)的多重RT-PCR检测方法,本研究根据GenBank中登录的PEDV S基因、TGEV S基因和PRV VP6基因序列设计合成引物,利用这3对引物对同一样品中的PEDV、TGEV、PRV进行多重RT-PCR扩增,结果显示,该方法可以同时扩增PEDV(682 bp)、TGEV(480 bp)和PRV(297 bp)的特异性DNA片段,而对猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒的PCR扩增结果均为阴性;敏感性试验结果表明,该多重RT-PCR方法对PEDV、TGEV和PRV的最低检出量分别为3.3×103拷贝/μL、3.2×103拷贝/μL和2.8×103拷贝/μL。利用建立的多重RT-PCR检测方法和单项RT-PCR对20份临床病料进行检测,结果显示,两者的总符合率为100%。结果表明建立的多重RT-PCR检测方法具有特异、快速、准确的特点,可以用于这3种病毒的同时检测和疾病的鉴别诊断。

主 题 词：多重聚合酶链式反应 猪流行性腹泻病毒 猪传染性胃肠炎病毒 猪轮状病毒 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-0589.2014.05.10

馆 藏 号：203135256...