绵羊外周血中游离DNA提取及SRY基因检测

作     者：蒋立斌 张云生 杨华 杨永林 石国庆 冯训勇 朱飞飞 JIANG Li-bin;ZHANG Yun-sheng;YANG Hua;YANG Yong-lin;SHI Guo-qing;FENG Xun-yong;ZHU Fei-fei

作者机构：石河子大学动物科技学院新疆石河子832000 新疆兵团绵羊繁育生物技术重点室验室新疆石河子832000 裕民县巴什拜羊繁育中心新疆裕民834800 

基　　金：国家科技部“863”计划(2011AA100307) 新疆兵团博士基金(2010JC10) 巴什拜羊多羔品系培育 “973”前期专项(2009CB125907) 

出 版 物：《新疆农业科学》 (Xinjiang Agricultural Sciences)

年 卷 期：2014年第51卷第7期

页      码：1342-1346页

摘      要：【目的】外周血中游离的DNA主要是指存在于血浆/血清等循环系统里的一些小片段DNA,应用在一些疾病的诊断以及非创伤性产前诊断方面。研究三种方法从绵羊外周血浆/血清中分离提取游离DNA,建立高效的外周血游离DNA提取方法,并对SRY基因进行PCR扩增。【方法】利用加热法、酚氯仿法以及试剂盒法对500μL血浆/血清中游离的DNA进行提取。根据游离DNA片段大小的特点分别设计扩增产物大小为168 bp的检测引物和178 bp的SRY基因引物进行普通PCR检测。【结果】利用加热法、酚氯仿法、试剂盒法都提取到了游离的DNA,PCR后通过琼脂糖凝胶电泳检测到了168 bp的目的片段。同时利用PCR扩增到了178 bp的SRY基因目的片段。【结论】不同的提取方法均可有效提取分离绵羊外周血血清和血浆中游离的DNA片段,能够用于SRY基因的检测。

主 题 词：绵羊 外周血游离DNA SRY 

学科分类：0905[农学-林学类] 09[农学] 

D　O　I：10.6048/j.issn.1001-4330.2014.07.024

馆 藏 号：203135562...