铜绿假单胞菌norB基因的克隆及表达

作     者：白植成 张燎原 胡开辉 孙淑静 杨云龙 BAI Zhi-cheng;ZHANG Liao-yuan;HU Kai-hui;SUN Shu-jing;YANG Yun-long

作者机构：福建农林大学生命科学学院福建福州350002 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(21407024) 

出 版 物：《化学与生物工程》 (Chemistry & Bioengineering)

年 卷 期：2015年第32卷第6期

页      码：19-22页

摘      要：为使norB基因得到有效表达,利用分子生物学技术将铜绿假单胞菌B136-33的norB基因克隆至表达载体pET-28a上。首先,根据GenBank公布的norB基因序列及表达载体pET-28a上的多克隆位点进行引物(含EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点)设计;然后以B136-33基因组为模板,扩增目的片段norB;产物经双酶切克隆至pET-28a后,化学转化至克隆菌DH5α,得到含有重组质粒的转化子DH5α-pET-28a-norB;再经双酶切和测序鉴定正确后,将重组质粒pET-28a-norB转化至表达菌BL21;最后,用SDS-PAGE鉴定norB基因表达产物的分子量。结果表明,norB能在BL21中得到正确有效的表达。

主 题 词：一氧化氮还原酶(Nor) 生物脱氮 铜绿假单胞菌 norB基因 克隆表达 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0903[农学-动物生产类] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 0713[0713] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1672-5425.2015.06.005

馆 藏 号：203135848...