他克莫司工程菌的构建及初步发酵工艺优化

作     者：王亚 黄鹤 边佳昕 周斌 胡海峰 WANG Ya;HUANG He;BIAN Jiaxin;ZHOU Bin;HU Haifeng

作者机构：中国医药工业研究总院上海医药工业研究院创新药物与制药工艺国家重点实验室上海201203 

基　　金：十二五大平台项目(Z-2-3) 

出 版 物：《中国医药工业杂志》 (Chinese Journal of Pharmaceuticals)

年 卷 期：2016年第47卷第2期

页      码：152-157页

摘      要：基于他克莫司的生物合成途径和机制,根据生物合成基因簇序列设计引物,通过PCR扩增天蓝色链霉菌(Streptomyces coelicolor)乙酰CoA羧化酶和游动放线菌(Actinoplanes sp.)N902-109赖氨酸环化脱氨酶/非核糖体肽合成酶(rapL/rapP)基因,将其整合到筑波链霉菌(Streptomyces tsukubaensis)No.9993基因组上,成功构建了分别过表达乙酰CoA羧化酶基因和rapL/rapP基因的重组工程菌,分别命名为SIPI-F002和SIPI-F003。试验结果显示,添加0.1%丙酸钠和0.01%油酸甲酯均可以促进工程菌SIPI-F002合成他克莫司,相应摇瓶产量为392和383mg/ml。调整发酵培养基复合碳源为4%糊精和2%可溶性淀粉,可以促进SIPI-F003发酵生产他克莫司,摇瓶产量达到694mg/ml。

主 题 词：他克莫司 乙酰CoA羧化酶基因 rapL/rapP基因 基因工程菌 PCR扩增 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.16522/j.cnki.cjph.2016.02.006

馆 藏 号：203136097...