重组腺相关病毒介导RNA干扰抑制EB病毒潜伏膜蛋白1对鼻咽癌细胞影响的动物试验
作者机构：南方医科大学南方医院耳鼻咽喉头颈外科 分子生物教研室广东广州510515 江西南昌解放军第九四医院耳鼻喉科江西南昌330002
基 金：国家自然科学基金项目(30471945) 广东省科技计划攻关项目(2003C30303)
出 版 物：《南方医科大学学报》 (Journal of Southern Medical University)
年 卷 期：2009年第29卷第4期
页 码：611-614,618页
摘 要：目的探讨EB病毒(EBV)潜伏膜蛋白1(LMP-1)对于鼻咽癌细胞在体内增殖及转移能力的影响。方法设计针对EBV-LMP-1的特异性发夹状RNA(shRNA)干扰序列,构建2种重组腺相关病毒(rAAV)载体:(增强型绿色荧光蛋白,EGFP)rAAV-EGFP和rAAV-shRNA-LMP-1,以不同滴度rAAV-EGFP转染鼻咽癌C666-1细胞确定最佳转染复数(MOI),rAAV-shRNA-LMP-1按MOI转染C666-1,RT-PCR鉴定抑制效率,将体外转染RNA干扰后的C666-1细胞注入裸鼠肝脏包膜下制作鼻咽癌异位肝种植的肝肺转移模型,观察肝脏成瘤及肝内、肺转移情况,分析LMP-1基因沉默在动物水平对鼻咽癌细胞成瘤及转移能力的影响。结果rAAV-EGFP以5×104v.g(virus genome,病毒基因组数)/细胞转染C666-1细胞,转染效率大于95%,RT-PCR鉴定rAAV-shRNA-LMP-1以5×104v.g/细胞转染C666-1后目的基因抑制效率大于90%,动物试验结果显示rAAV-shRNA-LMP-1组肝脏成瘤体积与对照组rAAV-EGFP无显著差异,但显著减少了种植肿瘤的肝内及肺转移率。结论通过rAAV介导RNA干扰能有效抑制LMP-1基因表达,可在动物水平抑制鼻咽癌细胞转移,但对鼻咽癌细胞生长无显著影响。
主 题 词：鼻咽癌 重组腺相关病毒 RNA干扰 EB病毒潜伏膜蛋白1 转移
学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学]
核心收录：
D O I：10.3321/j.issn:1673-4254.2009.04.004
馆 藏 号：203136340...
