口蹄疫病毒3D蛋白C端Th表位的重组表达及免疫功能鉴定

作     者：王世红 张改平 卢清侠 金前跃 刘畅 常咏哲 王爱萍 WANG Shihong;ZHANG Gaiping;LU Qingxia;JIN Qianyue;LIU Chang;CHANG Yongzhe;WANG Aiping

作者机构：郑州大学生物工程系郑州450001 河南省农业科学院农业部动物免疫学重点开放实验室河南省动物免疫学重点实验室郑州450002 

基　　金：河南省级重点实验室建设专项基金项目(122300413217) NSFC-河南人才培养联合基金(U1204327) 

出 版 物：《西北农业学报》 (Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica)

年 卷 期：2013年第22卷第4期

页      码：11-16页

摘      要：为获得含有口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)3D蛋白C端多个Th表位的重组表达蛋白,根据口蹄疫3DC端160个氨基酸序列,设计优化并人工合成相应的核酸序列,将其克隆至pET28a,构建原核表达质粒pET28a-C160,并将重组质粒转化BL21(DE3),0.5mmol/L IPTG诱导后,收集菌液进行SDS-PAGE和Western-blot鉴定。结果显示,在25ku处有一条明显的蛋白表达条带,且重组蛋白能与豚鼠抗O型口蹄疫病毒阳性血清发生特异性反应。对表达产物进行可溶性分析,结果显示,表达蛋白全部以包涵体形式存在,经变复性后获得较高质量浓度的纯化蛋白。可见:用纯化的3DC160蛋白作为Th佐剂与口蹄疫主抗原混合制成疫苗,免疫后能刺激猪体产生较高水平的口蹄疫抗体。

主 题 词：口蹄疫病毒 3D蛋白 Th表位 原核表达 蛋白纯化 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号：203136533...