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性激素促进鸡胚胎干细胞向雄性生殖细胞分化

性激素促进鸡胚胎干细胞向雄性生殖细胞分化

作     者:张文慧 蒋一秀 王颖洁 左其生 李东 连超 汤贝贝 张亚妮 李碧春 

作者机构:扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009 

基  金:国家自然科学基金项目(31272429、31472087、31301959) 江苏省高校优势学科建设工程资助项目 

出 版 物:《中国家禽》 (China Poultry)

年 卷 期:2016年第38卷第8期

页      码:10-16页

摘      要:试验分别探讨了睾酮和FSH诱导鸡胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESCs)向雄性生殖细胞分化的作用效果。首先筛选睾酮和卵泡刺激素(FSH)的适宜诱导浓度,在RA和支持细胞的诱导基础上分别添加适宜浓度的睾酮和FSH对传至2代的ESCs进行诱导,通过形态学观察、实时荧光定量PCR及免疫细胞化学对诱导结果进行检测。结果显示:睾酮和FSH的适宜诱导浓度分别为15 ng/m L和25 ng/m L,单独使用睾酮和FSH诱导均未出现类SSCs样细胞;二者联合支持细胞和RA诱导,诱导2 d出现类胚体,随后类胚体体积逐渐变大,诱导12 d类胚体解体出现类SSC样细胞;实时荧光定量PCR结果显示,睾酮和FSH分别与支持细胞和RA共同诱导组中,Stra8表达量持续上调,integrinβ1、Dazl表达量显著上调,ESCs标记基因Nanog、Sox2表达量均呈持续下降趋势;睾酮的多因素诱导组中,Dazl的表达量明显高于RA和支持细胞诱导组;而FSH的多因素诱导组中Stra8的表达量相对于RA和支持细胞诱导组也显著升高。结果表明睾酮和FSH单独诱导不能引起ESCs向雄性生殖细胞分化,但可以促进支持细胞和RA诱导ESCs向雄性生殖细胞分化的作用效果,该结果为进一步研究雄性生殖细胞的形成和调控机制提供理论基础。

主 题 词:鸡胚胎干细胞 雄性生殖细胞 分化 睾酮 卵泡刺激素 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 0905[农学-林学类] 09[农学] 071007[071007] 0836[0836] 090501[090501] 

D O I:10.16372/j.issn.1004-6364.2016.08.003

馆 藏 号:203136659...

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