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带电短肽T_(7)+、T_(6)-对α-淀粉酶活性和构象的影响

带电短肽T_(7)+、T_(6)-对α-淀粉酶活性和构象的影响

作     者:杨晓钰 李传博 刘春莹 孙付保 窦少华 Yang Xiaoyu;Li Chuanbo;Liu Chunying;Sun Fubao;Dou Shaohua

作者机构:大连大学生命健康学院辽宁大连116622 辽宁省海洋微生物工程技术研究中心辽宁大连116622 大连市动物免疫重点实验室辽宁大连116622 江南大学生物工程学院江苏无锡214122 

基  金:辽宁省教育厅高校基本科研面上项目(JYTMS20230376) 辽宁省自然科学基金项目(2014020134) 

出 版 物:《中国食品学报》 (Journal of Chinese Institute Of Food Science and Technology)

年 卷 期:2024年第24卷第7期

页      码:14-23页

摘      要:利用带不同电荷的短肽T_(7)+、T_(6)-,探讨正电荷短肽T_(7)+和负电荷短肽T_(6)-对α-淀粉酶的活性和构象的影响。将短肽加入α-淀粉酶体系后,测定其相对酶活、米氏常数(Km)、活化能、Zeta电位等指标。为了更清晰地观察不同带电量的短肽对α-淀粉酶构象的影响,通过紫外吸收光谱、荧光光谱、同步荧光光谱、圆二色光谱进一步考察α-淀粉酶构象的变化。结果表明,将带电短肽加入α-淀粉酶的酶促反应中,正电荷短肽T7+抑制α-淀粉酶酶活,当短肽质量浓度为10^(-7)g/mL时,α-淀粉酶相对酶活降低2.40%,同时也使α-淀粉酶与可溶性淀粉的亲和力降低,活化能升高,Zeta电位增加。负电荷短肽T_(6)-促进α-淀粉酶酶活,当短肽质量浓度为10^(-7)g/mL时,α-淀粉酶相对酶活升高1.40%,同时也使α-淀粉酶与可溶性淀粉的亲和力升高,活化能降低,Zeta电位增加。光谱分析表明,不同带电短肽使α-淀粉酶的紫外-可见吸收光谱、荧光光谱以及二级结构发生不同程度的改变。这表明不同带电短肽可以发挥与电场相似的作用,即电场在作用于蛋白质时,产生的电场力促使蛋白质构象发生改变,人工设计合成短肽所带的表面电荷影响酶表面电荷的分布,进而导致酶的活性和构象发生改变。

主 题 词:α-淀粉酶 带电短肽 相对酶活 构象 

学科分类:0832[0832] 08[工学] 083201[083201] 

核心收录:

D O I:10.16429/j.1009-7848.2024.07.002

馆 藏 号:203137202...

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