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血管钠肽(VNP)在大肠杆菌中的表达、纯化及活性分析

血管钠肽(VNP)在大肠杆菌中的表达、纯化及活性分析

作     者:李鹏 于军 陈健康 陈蕴 房聪 邱爽 丁月娣 金坚 Li Peng;Yu Jun;Chen Jiankang;Chen Yun;Fang Cong;Qiu Shuang;Ding Yuedi;Jin Jian

作者机构:江南大学医药学院药物设计与分子药理学实验室无锡214122 第四军医大学基础部生理学教研室西安710032 

基  金:国家重大新药创制资助课题(2009ZX09103) 

出 版 物:《生物技术通报》 (Biotechnology Bulletin)

年 卷 期:2011年第27卷第5期

页      码:190-199页

摘      要:利钠肽家族成员在维持机体心血管平衡等方面发挥着重要的生理作用。人工设计的新型利钠肽分子血管钠肽(VNP)由C-型利钠肽和A-型利钠肽的功能结构域嵌合组成,具备两种利钠肽分子的优势功能。采用分子生物学方法,构建了BL21(DE3)/pGEX-4T-1-VNP原核表达系统,在大肠杆菌中实现了融合蛋白GST-VNP的可溶性表达。经离心、超声波破碎、GST亲和层析、G25凝胶过滤和肠激酶酶切后超滤离心便可获得电泳纯的目的产物VNP,最终每升发酵液可获得20 mg重组VNP蛋白。大鼠离体血管环张力法和去膀胱尿液收集法活性评价显示,VNP具有扩张血管和利尿双重功效。

主 题 词:血管钠肽 利钠肽 融合蛋白 纯化 活性 

学科分类:1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D O I:10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2011.05.018

馆 藏 号:203137227...

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