牛奶β-乳球蛋白质实时荧光定量PCR检测方法的建立

作     者：贾敏 张银志 张亦凡 孙秀兰 JIAMin;ZHANGYinzhi;ZHANGYifan;SUNXiulan

作者机构：江南大学食品学院江苏无锡214122 食品科学与技术国家重点实验室江南大学江苏无锡214122 汉中市产品质量监督检验所陕西汉中723000 

基　　金：国家"十二五"科技支撑计划项目(2011BAK10B03) 

出 版 物：《食品与生物技术学报》 (Journal of Food Science and Biotechnology)

年 卷 期：2015年第34卷第6期

页      码：605-612页

摘      要：建立一种快速、特异、灵敏的Taqman实时荧光定量PCR（real-time PCR）方法,用于牛奶主要过敏原β-乳球蛋白质的检测。根据Gen Bank登录的牛β-乳球蛋白质的DNA序列设计,合成一对特异性引物和探针。将扩增产物连接到p MD19-T载体上,制备质粒标准品并测序鉴定,10倍梯度稀释含有β-乳球蛋白质基因的重组质粒,进行实时荧光定量PCR扩增,绘制标准曲线,检测该方法的特异性、稳定性、灵敏性,同时将建立的方法用于10种市售食品的检测。成功建立了β-乳球蛋白质的实时荧光定量PCR检测方法,标准曲线的Ct值与模板浓度在3.18×103~3.18×107copies范围内线性关系良好,R2值为0.997 8;检测灵敏度高（318 copies/μL）;特异性强,对羊奶、豆浆DNA均无扩增反应;稳定性好,组内、组间的变异系数均在5%以内。对10种食品牛奶过敏原的检测结果与标签相符。表明所建立的实时荧光定量PCR方法可应用于食品中牛奶过敏原β-乳球蛋白质的检测并可推广到其它过敏原的检测。

主 题 词：牛奶过敏原质 β-乳球蛋白质 Taqman实时荧光定量PCR法 检测 

学科分类：0832[0832] 08[工学] 083203[083203] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-1689.2015.06.010

馆 藏 号：203137252...