伤寒沙门菌fljA样基因缺陷变异株的制备

作     者：徐顺高 马洁 周丽萍 张驰宇 黄新祥 XU Shun-gao;MA Jie;ZHOU Li-ping;ZHANG Chi-yu;HUANG Xin-xiang

作者机构：江苏大学医学技术学院江苏镇江212001 

基　　金：江苏大学高级人才科研启动基金资助项目(04JDG008) 

出 版 物：《江苏大学学报（医学版）》 (Journal of Jiangsu University：Medicine Edition)

年 卷 期：2005年第15卷第3期

页      码：205-208页

摘      要：目的:为探讨z66鞭毛抗原阳性伤寒沙门菌的fljA样基因的功能,制备沙门菌fljA样基因缺陷变异株。方法:根据伤寒沙门菌fljA样基因序列,设计PCR特异性引物并在5 末端加接酶BglII位点,扩增fljA样基因上、下游片段,用BglII消化后,定向连接成fljA样基因的缺损性同源性核苷酸片段,先克隆至pGEM T质粒,再经BamHI酶切后导入自杀质粒pGMB151,电转化入伤寒沙门菌(GIFU10007),进行同源重组。用PCR观察重组现象,将完全重组的菌株作为fljA样基因的缺陷变异株,并通过相应的核苷酸序列分析加以确定。结果:PCR及序列分析证实,缺陷变异株的fljA样基因缺失231个碱基。结论:成功构建伤寒沙门菌fljA样基因缺陷变异株,为进一步研究其在伤寒沙门菌鞭毛抗原表达的调控作用奠定了基础。

主 题 词：伤寒沙门菌 基因缺陷变异 fljA 同源重组 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 07[理学] 100103[100103] 071007[071007] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1671-7783.2005.03.007

馆 藏 号：203137326...