大肠杆菌表面CS3菌毛展示随机肽库的构建

作     者：刘向昕 袁盛凌 展德文 郑继平 刘纯杰 王芃 王令春 张兆山 Xiang-Xin Liu;Sheng-Ling Yuan;De-Wen Zhan;Ji-Ping Zheng;Chun-Jie Liu;Peng Wang;Ling-Chun Wang;Zhao-Shan Zhang

作者机构：中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所北京市100071 

基　　金：国家高技术研究发展863计划项目.No.21004AA215212 

出 版 物：《世界华人消化杂志》 (World Chinese Journal of Digestology)

年 卷 期：2006年第14卷第2期

页      码：158-162页

摘      要：目的:在肠毒素性大肠杆菌CS3菌毛表面构建 10肽随机肽库．方法:首先将原有的单酶切CS3菌毛呈现载体改造为双酶切载体,并证实改造后的载体能正确形成CS3菌毛．同时设计合成2条寡核苷酸序列,链1含有1个10肽随机编码序列(NNS)10, 链2可与链1的3′端互补．两条链经过退火、延伸、酶切和回收与经过同样酶切的呈现载体连接,连接产物纯化后分多次电击转化,获得随机肽库．随机挑选10个克隆进行测序并对测序结果进行分析．结果:获得1个库容量为1．8×106大小的随机肽库．测序结果显示,所构建肽库的基本框架与预期设计相符,4个寡核苷酸出现的频率也与理论值相接近．结论:在肠毒素性大肠杆菌CS3菌毛表面成功构建库容量为1．8×106大小的10肽随机肽库．为下一步利用肽库进行筛选奠定了基础．

主 题 词：CS3菌毛 细菌表面展示 随机肽库 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100102[100102] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1009-3079.2006.02.006

馆 藏 号：203137770...