云南松SSR-PCR反应体系的优化研究

作     者：蔡年辉 吕学辉 贺斌 陈诗 李根前 CAI Nian-hui;LV Xue-hui;HE Bin;CHEN Shi;LI Gen-qian

作者机构：西南林业大学西南山地森林保育与利用省部共建教育部重点实验室云南昆明650224 

基　　金：国家自然科学基金项目(31260191) 云南省教育厅科学研究基金重大专项项目(ZD2009003B)资助 

出 版 物：《西部林业科学》 (Journal of West China Forestry Science)

年 卷 期：2013年第42卷第6期

页      码：57-61页

摘      要：本项研究以云南松实生苗幼嫩针叶为材料,采用单因素试验设计,分析云南松SSR-PCR扩增反应体系中各组分对扩增结果的影响,并进一步采用正交试验设计对SSR-PCR扩增反应程序进行优化。结果表明,在15μL SSR-PCR反应体系中包括,1×Taq PCR Buffer,模板DNA用量30 ng,Taq聚合酶用量1.0 U,0.2 mmol·L-1dNTPs,3.0 mmol·L-1Mg2+以及正、反引物各0.2μmol·L-1;扩增反应程序为,94℃预变性4 min;94℃变性30 s,退火30 s,72℃延伸45 s,35个循环;最后72℃延伸10 min,4℃保存。该反应条件的建立为开展云南松种质资源SSR分子标记研究提供了参考依据。

主 题 词：云南松 SSR—PCR 反应 体系 程序 优化 

学科分类：0907[农学-草药学] 08[工学] 0829[工学-安全科学与工程类] 09[农学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1672-8246.2013.06.009

馆 藏 号：203138089...