三向连接构造组合引物介导的滚环扩增技术检测肠道病毒71型方法的建立

作     者：周敏 张宏萍 陆仁飞 李雪梅 

作者机构：南通市疾病预防控制中心江苏南通226001 南通市第三人民医院 

基　　金：江苏省南通市科技项目(HS2013028) 江苏省南通市卫生局资助项目(W201224) 

出 版 物：《山东医药》 (Shandong Medical Journal)

年 卷 期：2015年第55卷第28期

页      码：21-23,111页

摘      要：目的建立三向连接构造(3WJ)组合引物介导的滚环扩增(PG-RCA)技术检测肠道病毒71型(EV71)的方法,并验证其检测效果。方法根据EV71的VP1基因保守区设计引物模板、引物以及环状探针前体,确立反应体系及反应条件,实时荧光PCR仪监测扩增结果。采用已建立的3WJ组合PG-RCA技术检测16例手足口病患儿咽拭子标本(EV71阳性12例、柯萨奇病毒A阳性2例、柯萨奇病毒B阳性2例)。结果已建立的3WJ组合PG-RCA技术能检测到amol级的EV71 RNA,说明方法建立成功。EV71阳性标本扩增曲线荧光强度均超过阈值;柯萨奇病毒A、B阳性标本扩增曲线荧光强度均低于阈值。结论成功建立3WJ组合PG-RCA技术检测EV71的方法,检测效果好。

主 题 词：肠道病毒71型 恒温扩增 滚环扩增 三向连接 

学科分类：100208[100208] 1002[医学-临床医学类] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1002-266X.2015.28.007

馆 藏 号：203138745...