犬瘟热病毒和犬腺病毒2型双重TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

作     者：扈富哥 宫英杰 王蕾 莫菲 毕振威 钱晶 孙斌 谭业平 HU Fuge;GONG Yingjie;WANG Lei;MO Fei;BI Zhenwei;QIAN Jing;SUN Bin;TAN Yeping

作者机构：黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319 江苏省农业科学院兽医研究所江苏南京210014 南通伊仕生物技术股份有限公司江苏南通226010 兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心江苏泰州225300 

基　　金：江苏省农业自主创新资金项目[CX(22)3024] 

出 版 物：《畜牧与兽医》 (Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2024年第56卷第9期

页      码：91-95页

摘      要：旨在建立犬瘟热病毒(CDV)和犬腺病毒2型(CAdV-2)双重TaqMan荧光定量PCR(RT-qPCR)检测方法。本试验针对CDV的N基因和CAdV-2的E3基因设计两对特异性引物与两条标记不同荧光基团的TaqMan-MGB探针,对引物、探针的浓度、反应体系和反应条件进行优化后检测该方法的灵敏度,特异性及重复性。结果:该方法在CDV和CAdV-2阳性参考质粒浓度1×10^(1)~1×10^(7) copies/μL的范围中,R2值为0.997和0.993,表明所建的标准曲线具有良好线性关系,能检测到最低浓度为5 copies/μL,并对其他病原无扩增现象,特异性良好;重复性试验中组内和组间变异系数小于1.54%。综上,建立的双重TaqMan RT-qPCR检测方法具有灵敏度高且特异性好等优点,可用于CDV和CAdV-2临床快速检测和鉴别诊断及流行病学调查等领域。

主 题 词：犬瘟热病毒 犬腺病毒2型 荧光定量PCR 检测方法 

学科分类：090602[090602] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号：203138891...