白斑综合征病毒DETECTR检测系统的建立

作     者：徐博文 周傲白雪 廖秀云 蒋晓霞 邵建宏 沙才华 黄海超 赵福振 陈轩 罗宝正 XU Bowen;ZHOU Aobaixue;LIAO Xiuyun;JIANG Xiaoxia;SHAO Jianhong;SHA Caihua;HUANG Haichao;ZHAO Fuzhen;CHEN Xuan;LUO Baozheng

作者机构：拱北海关技术中心广东珠海519015 

基　　金：广东省重点领域研发计划(2022B1111030001) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2024年第54卷第8期

页      码：1056-1064页

摘      要：将重组酶介导等温扩增技术(RAA)与成簇的规律间隔短回文重复序列及其相关蛋白12a(CRISPR-Cas12a)检测系统相结合,针对白斑综合征病毒(WSSV)建立快速、灵敏、特异的DNA内切酶靶向CRISPR反式报告(DETECTR)检测系统。针对WSSV保守基因设计RAA引物与crRNA,通过实验筛选最优组合和最佳反应条件,构建WSSV DETECTR检测系统。对该系统进行灵敏度与特异性测试,与WOAH推荐的Real-timePCR和NestedPCR检测方法比较。结果显示,WSSV DETECTR检测系统最低检出限为10copies/μL,灵敏度与Real-time PCR、Nested PCR检测方法相当(均为3.34×10^(1)copies/μL),与其他病原之间无交叉反应,与Real-time PCR、Nested PCR对临床样本的检测结果相一致。结果表明,建立的WSSV DETECTR检测系统具有快速简单、灵敏、特异等优点,为白斑综合征病毒的快速检测提供了新的方法。

主 题 词：重组酶介导等温扩增技术(RAA) CRISPR-Cas12a 白斑综合征病毒 快速检测 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16656/j.issn.1673-4696.2024.0126

馆 藏 号：203138929...