靶向mdr1基因shRNA真核表达载体的构建及鉴定

作     者：干惠珠 张桂珍 张凤春 卜丽莎 杨绍娟 高申 郑德明 GAN Hui-zhu;ZHANG Gui-zhen;ZHANG Feng-chun;BU Li-sha;YANG Shao-juan;GAO Shen;ZHENG De-ming

作者机构：吉林大学中日联谊医院血液肿瘤科吉林长春130031 吉林大学中日联谊医院中心研究室吉林长春130031 上海交通大学医学部附属仁济医院肿瘤科上海200001 

基　　金：国家自然科学基金(No.30171064) 吉林大学创新基金(2003CX045)资助项目 

出 版 物：《蚌埠医学院学报》 (Journal of Bengbu Medical College)

年 卷 期：2007年第32卷第4期

页      码：384-387页

摘      要：目的:设计并构建靶向mdr1基因shRNA真核表达质粒。方法:以mdr1为靶基因设计具有短发夹结构的模板寡核苷酸,退火形成互补双链结构,再克隆至pSilencerTM3.1-H1neo载体,构建重组的短发夹shRNA表达载体。采用酶切法和测序法鉴定。结果:经限制性内切酶酶切电泳后显示有66bp模板寡核苷酸片段和4.3kbp的线性化的pSilencerTM3.1-H1neo载体片段。重组子测序结果与Genebank中的mdr1基因cDNA序列相符。结论:重组靶向mdr1基因shRNA表达载体构建正确,为进一步转染耐药的肿瘤细胞逆转肿瘤耐药研究奠定了基础。

主 题 词：mdr1基因 RNA干扰 shRNA表达载体 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-2200.2007.04.003

馆 藏 号：203139343...