实时荧光定量聚合酶链反应检测鸭乙型肝炎病毒方法的建立及应用

作     者：陈宗艳 程安春 汪铭书 徐大为 郭宇飞 陈孝跃 CHEN Zong-yan;CHENG An-chun;WANG Ming-shu;XU Da-wei;GUO Yu-fei;CHEN Xiao-yue

作者机构：四川农业大学动物科技学院禽病防治研究中心四川雅安625014 四川省动物疫病与人类健康重点实验室四川雅安625014 

基　　金：国家科技攻关重大项目(2004BA901A03) 四川省生物技术基金资助项目(05NG018-03) 四川省重点建设学科基金资助项目(SZD0418) 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2008年第28卷第2期

页      码：140-145页

摘      要：根据鸭乙型肝炎病毒(duck hepatitis B virus,DHBV)P基因上的保守序列设计并合成引物和荧光标记探针,建立了荧光定量聚合酶链反应检测方法。本试验建立的标准曲线循环阈值(Ct值)与模板浓度具有良好的线性关系,相关系数为0.996;将其检测极限的Ct值通过标准曲线换算成拷贝数约为5 copies/L,相当于5个DHBV颗粒。初步结果表明,FQ-PCR检测DHBV-DNA能直接反映DHBV感染鸭后血清和肝组织中DHBV-DNA水平,在判断体内DHBV是否复制、复制的程度以及是否被清除等方面明显优于常规PCR,为DHBV感染动物模型的建立提供了敏感和可靠的检测手段,有很好的应用前景和研究价值。将所建立的方法运用于检测拉米夫定治疗DHBV感染鸭后外周血和肝组织DHBV-DNA的含量,以评价拉米夫定治疗DHBV的效果。结果表明拉米夫定对DHBV的复制有较好的抑制效果,但停药后出现反跳现象。

主 题 词：鸭乙型肝炎病毒 乙型肝炎病毒 FQ-PCR 拉米夫定 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.16303/j.cnki.1005-4545.2008.02.026

馆 藏 号：203139368...