流行性乙型脑炎病毒一步法RT-LAMP检测方法的建立

作     者：杜鹃 宋永 刘立科 华荣虹 DU Juan;SONG Yong;LIU Li-ke;HUA Rong-hong

作者机构：黑龙江大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150080 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 

基　　金：国家自然科学基金(30700027) 公益性行业科研专项(200803015) 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2010年第32卷第10期

页      码：773-776页

摘      要：为建立一种简便、快速、灵敏、特异的乙型脑炎病毒(JEV)检测方法,本研究根据GenBank中登录的25株流行性JEV基因组序列,设计3对特异性的环介导等温扩增(LAMP)引物,优化反应体系,建立了一步法反转录-LAMP(RT-LAMP)检测方法。该方法检测时间短,灵敏度比常规RT-PCR方法高,可检测出103TCID50/0.2mL JEV;特异性强,对猪细小病毒、猪圆环病毒、伪狂犬病毒、猪瘟病毒等常见猪病毒均无交叉反应。结果判定时只需要在扩增产物中加入SYBR GreenⅠ染料,就可以直接在可见光或紫外光下观察颜色变化。该方法简便快捷,省时省力,是一种适用于基层实验室快速、准确检测流行性JEV的方法。

主 题 词：流行性乙型脑炎病毒 反转录环介导等温扩增技术 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-0589.2010.10.07

馆 藏 号：203139474...