siRNA干扰铜绿假单胞菌MexAB—OprM外排泵MexB基因表达的体内效应研究

作     者：龚凤云 张定宇 张江国 占伟丽 宋莹 冯觉平 宋建新 GONG Feng-yun;ZHANG Ding-yu;ZHANG Jiang-guo;ZHAN Wei-li;SONG Ying;FENG Jue-ping;SONG Jian-xin

作者机构：华中科技大学同济医学院附属普爱医院感染科武汉430030 华中科技大学同济医学院附属普爱医院麻醉科武汉430030 华中科技大学同济医学院附属普爱医院肿瘤科武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院感染科 

基　　金：国家自然科学基金(30873189) 

出 版 物：《中华微生物学和免疫学杂志》 (Chinese Journal of Microbiology and Immunology)

年 卷 期：2012年第32卷第11期

页      码：944-948页

摘      要：目的探讨RNA分子干扰铜绿假单胞菌MexAB—OprM外排泵MexB基因的体内效应。方法针对MexAB-OprM外排泵MexB基因设计siRNA小分子，构建干扰RNA（shRNA）表达载体，将带有小分子干扰RNA（siRNA）质粒电转入铜绿假单胞菌，从小鼠支气管内直接予以siRNA质粒干扰PAO琼脂菌体悬液（1×10^7CFU／ml）攻击，建立PA01野生型及siRNA2干扰型和siRNA阴性对照分子干扰型菌株的肺部感染动物模型。于感染后第1、2、3天腹腔注射美罗培南（100mg／kg，2次／d）。感染后第3、5、7天评估各组小鼠肺部细菌学、肺部病理学、细胞因子水平及肺组织中性粒细胞募集（MPO）水平变化。结果siRNA2干扰组小鼠，感染后3、5、7d的肺部细菌负荷明显下降。且与siRNAnon组和ScrambledsiRNA组比较，siRNA2干扰组小鼠感染早期（3d）病理学改变明显减轻；MPO及炎性细胞因子（IL-1β和IL-12）表达水平升高。而在感染后期（7d）siRNA2干扰组小鼠炎性细胞因子表达水平则下降。结论siRNA分子干扰明显增加小鼠对铜绿假单胞菌感染的抵抗力，降低肺部细菌的载量，增加早期中性粒细胞募集到感染部位并诱导铜绿假单胞菌的早期免疫应答。siRNA分子联合抗生素的治疗，为慢性铜绿假单胞菌肺部感染的治疗提供了有意义的资料。

主 题 词：siRNA 铜绿假单胞菌 MexB基因 MexAB—OprM外排泵 

学科分类：100208[100208] 1002[医学-临床医学类] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2012.11.006

馆 藏 号：203139582...