CD14稳定沉默胃癌细胞系的建立及其侵袭能力研究

作     者：李康 旦增 王中华 德吉 陈晓红 刘明花 LI Kang;DAN Zeng;WANG Zhong-hua;DE Ji;CHEN Xiao-hong;LIU Ming-hua

作者机构：西藏自治区人民医院消化内科西藏拉萨850000 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No:81060165) 

出 版 物：《中国癌症杂志》 (China Oncology)

年 卷 期：2013年第23卷第4期

页      码：254-259页

摘      要：背景与目的:白细胞分化抗原14(cluster of differentiation antigen 14,CD14)为脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)的高亲和受体,能够识别革兰阴性菌、真菌以及结核杆菌并介导机体的炎性反应,为病菌引发多种细胞信号转导的第一步,在肿瘤组织以及癌细胞中常呈异常表达。近来有研究指出,CD14启动子区的功能性突变能够影响CD14的表达,并增加幽门螺杆菌感染后罹患胃癌的风险,据此推测CD14与胃癌的发生、发展密切相关。本研究拟构建CD14-shRNA干扰载体,建立CD14稳定沉默的胃癌细胞系,初步探讨CD14对胃癌细胞侵袭能力的影响,以期为胃癌发病机制的研究奠定实验基础。方法:根据shRNA引物设计原则设计并合成4条CD14-shRNA序列,构建sh-CD14表达载体,转染MGC-803细胞,G418筛选稳转细胞系;RT-PCR检测CD14 mRNA的表达;蛋白质印迹法(Western blot)检测CD14蛋白的表达;Transwell小室模型检测细胞的侵袭能力。结果:测序结果表明,CD14-shRNA表达载体构建成功并筛选得到了CD14稳定沉默的胃癌细胞系,其CD14 mRNA以及蛋白的表达分别降低了71.7%%和63.4%;与对照组相比CD14-shRNA组细胞侵袭能力显著降低,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论:成功构建了CD14-shRNA干扰载体并获得了CD14稳定沉默的胃癌细胞系,初步证实CD14的沉默能够影响胃癌细胞的侵袭能力。

主 题 词：白细胞分化抗原14 shRNA载体构建 胃癌细胞 侵袭 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1007-3969.2013.04.003

馆 藏 号：203139597...