蓝氏贾第鞭毛虫PPDK特异性锤头状核酶-GCV重组载体的构建及鉴定

作     者：曹利静 冯宪敏 卢思奇 张西臣 王凤云 CAO Li-Jing;FENG Xian-Min;LU Si-Qi;ZHANG Xi-Chen;WANG Feng-Yun

作者机构：首都医科大学病原生物学系北京100069 吉林大学畜牧兽医学院长春130062 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.30670224) 

出 版 物：《寄生虫与医学昆虫学报》 (Acta Parasitologica et Medica Entomologica Sinica)

年 卷 期：2008年第15卷第1期

页      码：1-7页

摘      要：丙酮酸磷酸双激酶(Pyruvatephos phate dikinase,PPDK)可能是蓝氏贾第鞭毛虫能量代谢中具有催化作用的关键酶桩一。为了进一步探讨该酶在贾第虫能量代谢中的作用,本文采用RNA draw软件分析贾第虫编码PPDK的基因序列并设计特异性反义锤头状核酶(Hammerheade ribozyme),克隆该核酶序列并与犬贾第虫病毒(GCV)连接,构建了载有特异性锤头状核酶的贾第虫病毒重组载体pGCV634/H5/2174。该载体经线性化处理后进行体外转录,转录产物以电击方式转染对数生长期的贾第虫滋养体。提取转染后24h虫体总RNA,并以其为模板进行RT-PCR验证转染效果和对靶mRNA的切割效果。结果初步证实了该载体对虫体细胞内编码PPDK的mRNA具有切割作用。

主 题 词：蓝氏贾第鞭毛虫 丙酮酸磷酸双激酶 锤头状核酶 贾第虫病毒 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-0507.2008.01.001

馆 藏 号：203140205...