基于CHO细胞定点整合技术的新型抗体呈现系统的构建

作     者：何阳阳 刘敏 李春 张畅 孙志伟 刘志刚 王双 庞晓斌 HE Yang-yang;LIU Min;LI Chun;ZHANG Chang;SUN Zhi-wei;LIU Zhi-gang;WANG Shuang;PANG Xiao-bin

作者机构：军事医学科学院生物工程研究所北京100071 河南大学药学院开封475000 中国农业大学生命科学学院北京100193 解放军208医院药剂科长春130062 

出 版 物：《军事医学》 (Military Medical Sciences)

年 卷 期：2012年第36卷第8期

页      码：608-612,625页

摘      要：目的建立一个以CHO定点整合系统为基础的高通量抗体筛选平台,筛选获得抗VEGF高亲和力突变体抗体。方法设计并构建了基于CHO细胞定点整合系统的通用minibody展示载体,将3株亲和力已知的抗VEGF抗体(A6,A63,A657)和1个抗VEGF轻链抗体库分别呈现在CHO细胞的表面,通过Western印迹、Bia-core3000、流式细胞分析等对该展示系统进行验证和评价,并通过流式细胞分选技术对抗体库进行了细胞筛选。结果成功实现了抗VEGF抗体在CHO细胞表面的展示,流式细胞分析抗体的亲和力与Biacore测定全抗体亲和力结果一致;通过筛选获得3株抗VEGF高亲和力突变体抗体。结论建立了基于CHO定点整合技术的新型抗体库展示系统,为抗体的亲和力成熟、分子改造等突变库的构建和筛选提供了新的技术支持。

主 题 词：抗体库 CHO细胞 展示系统 高通量筛选 抗VEGF特异性抗体 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1001[医学-基础医学] 07[理学] 071009[071009] 09[农学] 100102[100102] 0901[农学-植物生产类] 090102[090102] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1674-9960.2012.08.014

馆 藏 号：203140209...