hsa_circ_0001776靶向miR-1265调控肺鳞状细胞癌的发展及其临床意义

作     者：洪紫谦 崔逸爽 田亚萍 吴亚男 郑璇 冯业 孙国贵 Hong Ziqian;Cui Yishuang;Tian Yaping;Wu Yanan;Zheng Xuan;Feng Ye;Sun Guogui

作者机构：华北理工大学公共卫生学院唐山063210 河北省医工融合精准医疗重点实验室唐山063000 唐山市人民医院中心实验室唐山063000 

基　　金：国家自然科学基金面上项目(82172658) 唐山市小细胞肺癌医工融合精准诊疗基础创新团队(21130203D) 河北省自然科学基金项目(H2023209083) 华北理工大学公共卫生学院高水平科研创新团队建设计划(KYTD202309) 唐山市市级科技计划项目(24150218C) 2024年政府资助临床医学优秀人才培养项目(ZF2024193) 

出 版 物：《中华肿瘤杂志》 (Chinese Journal of Oncology)

年 卷 期：2024年第46卷第9期

页      码：889-903页

摘      要：目的探讨hsa_circ_0001776与miR-1265在肺鳞状细胞癌(鳞癌)中的作用及机制。方法收集2020—2022年于唐山市人民医院治疗的肺鳞癌患者血浆和健康人血浆。肺鳞癌组织芯片和癌旁正常组织芯片于2022年购自上海芯超生物科技有限公司。采用实时定量聚合酶链式反应检测hsa_circ_0001776在肺鳞癌血浆、组织及细胞中的表达情况,荧光原位杂交验证hsa_circ_0001776在肺鳞癌细胞NCI-H1703中的定位。体外培养肺鳞癌细胞NCI-H1703、NCI-H226,分为circ-NC组、过表达hsa_circ_0001776组、miR-NC组、miR-1265 mimic组、过表达hsa_circ_0001776+miR-NC组和过表达hsa_circ_0001776+miR-1265 mimic组,采用细胞计数试剂盒8法、细胞克隆形成实验、Transwell实验和划痕实验以及流式细胞术分别检测过表达hsa_circ_0001776、过表达miR-1265以及过表达hsa_circ_0001776和miR-1265 mimic的挽救实验对肺鳞癌细胞NCI-H1703和NCI-H226的增殖、克隆、侵袭、迁移和凋亡的影响。通过circular RNA Interactome网站预测hsa_circ_0001776下游的miR-1265,双荧光素酶报告基因实验确定hsa_circ_0001776、miR-1265之间的相互作用,裸鼠皮下成瘤实验检测稳定过表达hsa_circ_0001776的NCI-H1703细胞对移植瘤生长的影响。结果荧光原位杂交结果显示,肺鳞癌组织中hsa_circ_0001776的荧光强度低于癌旁组织,肺鳞癌组织中miR-1265荧光强度高于癌旁组织(均P<0.05)。肺鳞癌患者血浆中hsa_circ_0001776的表达水平低于健康人血浆,miR-1265表达水平高于健康人血浆(均P<0.05)。肺鳞癌细胞NCI-H1703、NCI-H226和SK-MES-1中hsa_circ_0001776的表达水平均低于支气管上皮细胞BEAS-2B(均P<0.05),miR-1265在NCI-H1703、NCI-H226中的相对表达水平高于人支气管上皮细胞BEAS-2B(均P<0.05)。hsa_circ_0001776低表达与肺鳞癌患者的年龄、淋巴结转移、临床分期以及肿瘤分期有关(均P<0.05)。荧光原位杂交结果显示,hsa_circ_0001776主要在细胞质中表达。双荧光素酶报告实验结果表明,miR-1265与hsa_circ_0001776存在互补结合位点。过表达hsa_circ_0001776组NCI-H1703、NCI-H226细胞吸光度值均低于circ-NC组(均P<0.05)。过表达hsa_circ_0001776组细胞克隆数为(52±3)个、(53±4)个,迁移细胞数为(476±17)个、(113±7)个,侵袭细胞数为(100±2)个、(184±2)个,细胞迁移率为(25.00±4.36)%、(36.02±5.55)%,均低于circ-NC组[分别为(104±4)个和(106±2)个,(783±29)个和(517±16)个,(657±45)个和(473±9)个,(48.95±8.69)%和(48.70±1.57)%,均P<0.05]。过表达hsa_circ_0001776组细胞凋亡率分别为(24.77±2.30)%和(19.67±1.16)%,均高于circ-NC组[分别为(11.83±1.15)%和(9.50±0.66)%,均P<0.05]。miR-1265 mimic组NCI-H1703、NCI-H226细胞吸光度值均高于miR-NC组(均P<0.05)。miR-1265 mimic组细胞克隆数为(56±13)个和(51±8)个,迁移细胞数为(556±13)个、(405±6)个,侵袭细胞数为(486±6)个、(359±7)个,细胞迁移率为(68.56±5.51)%、(81.74±8.04)%,均高于miR-NC组[分别为(31±4)个和(21±8)个,(154±19)个和(186±5)个,(227±6)个和(176±7)个,(25.83±4.26)%和(53.12±4.14)%,均P<0.05]。miR-1265 mimic组细胞凋亡率分别为(11.83±2.55)%、(17.50±1.05)%,均低于miR-NC组[分别为(32.67±4.44)%、(39.90±2.88)%,均P<0.05]。过表达hsa_circ_0001776+miR-1265 mimic组中NCI-H1703、NCI-H226吸光度值均高于过表达hsa_circ_0001776+miR-NC组(均

主 题 词：肺肿瘤 鳞状细胞癌 细胞增殖 迁移和侵袭 hsa_circ_0001776 miR-1265 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/cma.j.cn112152-20231024-00226

馆 藏 号：203140347...