口蹄疫3D蛋白N端T细胞表位重组蛋白的表达、纯化及鉴定

作     者：卢清侠 王世红 金前跃 李清州 郝慧芳 张改平 LU Qing-xia;WANG Shi-hong;JIN Qian-yue;LI Qing-zhou;HAO Hui-fang;ZHANG Gai-ping

作者机构：河南省农业科学院农业部动物免疫学重点开放实验室/河南省动物免疫学重点实验室河南郑州450002 河南省农业科学院农业经济与信息研究中心河南郑州450002 

基　　金：河南省级重点实验室建设专项(122300413217) 河南省博士后项目一等资助 

出 版 物：《河南农业科学》 (Journal of Henan Agricultural Sciences)

年 卷 期：2012年第41卷第9期

页      码：133-137页

摘      要：为获得具有抗原性的口蹄疫病毒(FMDV)3D蛋白N端T细胞表位的重组表达蛋白,根据FMDV3D蛋白前115位氨基酸序列,设计优化并人工合成相应的核酸序列,将其克隆至pET-28a中,构建原核表达质粒pET28a-115,并将重组质粒转化至BL21(DE3)细胞。经IPTG诱导后,收集菌液进行SDS-PAGE和Western-bolt鉴定,结果显示,在16kD处有一条明显的蛋白表达条带。对表达产物进行可溶性分析,结果表达蛋白50%为可溶性蛋白,经Ni-NTA亲和层析纯化后获得了较高浓度和纯度的目的蛋白。研究结果表明,含FMDV 3D蛋白前115位氨基酸的重组蛋白在大肠杆菌中得到了高效可溶性表达,并具有较好的抗原活性,为开发口蹄疫诊断试剂和基因工程疫苗奠定了基础。

主 题 词：口蹄疫 3D聚合酶 T细胞表位重组蛋白 原核表达 疫苗佐剂 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1004-3268.2012.09.034

馆 藏 号：203140692...