人成骨蛋白成熟肽基因在毕氏酵母(Pichia Yeast)中的高效表达

作     者：王忠泽 王慧 荫俊 

作者机构：军事医学科学院微生物流行病研究所中国北京100071 

基　　金：全军医药卫生科研基金资助项目(01MB059) 

出 版 物：《生命科学研究》 (Life Science Research)

年 卷 期：2002年第6卷第S1期

页      码：90-93页

摘      要：采用PCR方法,根据文献报道的人成骨蛋白（osteogenic protein-1,OP-1）成熟肽基因序列,设计并合成一对引物,从构建的含人成骨蛋白基因的质粒中扩增获得大小为420bp的DNA片段,连接到pGEM-T载体进行测序,证明获得人成骨蛋白成熟肽基因片段,并以pPIC9K为表达载体构建重组表达质粒,转化大肠杆菌细胞,经鉴定的阳性重组质粒并线形化,电转化毕氏酵母细胞GS115,于30℃进行甲醇诱导分泌表达,表达产物存在于培养基中,占分泌蛋白的10％.重组表达产物进行Western Blot可以检测到重组表达产物,ELISA检测其具有特异性结合活性.

主 题 词：人成骨蛋白 成熟肽 基因克隆 基因表达 毕氏酵母 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.16605/j.cnki.1007-7847.2002.s1.022

馆 藏 号：203140761...