siRNA干扰人BMP9重组腺病毒载体的构建及其促进乳腺癌SK-BR-3细胞增殖

作     者：刘月红 王科 孙笑笑 万绍恒 王维 陈莹莹 张彦 LIU Yue-hong;WANG Ke;SUN Xiao-xiao;WAN Shao-heng;WANG Wei;CHEN Ying-ying;ZHANG Yan

作者机构：重庆医科大学临床检验诊断学教育部重点实验室重庆400016 重庆医科大学附属永川医院检验科重庆402160 

基　　金：国家自然科学基金(81172017 30800658) 

出 版 物：《基础医学与临床》 (Basic and Clinical Medicine)

年 卷 期：2013年第33卷第2期

页      码：149-155页

摘      要：目的筛选特异性干扰人BMP9基因的siRNA序列并制备重组腺病毒AdsiBMP9,探讨RNAi人BMP9基因后对乳腺癌SK-BR-3细胞增殖能力的影响。方法设计制备3对干扰人BMP9的双链DNA序列,亚克隆至Pses-Hus质粒中获得Pses-Hus-siBMP9质粒,脂质体转染乳腺上皮细胞HBL-100筛选有效干扰质粒,构建重组腺病毒并感染SK-BR-3细胞,RT-PCR,Western blot检测BMP9表达,MTT检测细胞增殖能力。结果成功构建并筛选出针对人BMP9基因的有效干扰质粒并包装成腺病毒,病毒滴度为1×1010IU/mL,感染SK-BR-3细胞显示BMP9在转录水平和翻译水平表达量显著低于对照组和空白组(P<0.05),第5天AdsiBMP9组细胞的增殖率显著高于AdsiNC组(P<0.05)。结论成功构建特异性沉默人BMP9基因的siRNA腺病毒载体,可有效抑制SK-BR-3细胞中BMP9基因的表达从而促进该细胞增殖。

主 题 词：siRNA 人BMP9 重组腺病毒载体 肿瘤增殖 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.16352/j.issn.1001-6325.2013.02.021

馆 藏 号：203140781...