Taqman实时荧光定量PCR快速检测白斑综合症病毒的方法研究

作     者：王忠发 邵俊斌 沃健儿 王虹玲 蒋文雅 何伟贤 Wang Zhong-fa;Shao Jun-bin;WO Jian-er;WANG Hong-ling;Jiang Wen-ya;He Wei-xian

作者机构：浙江省舟山市疾病预防控制中心浙江舟山316000 浙江大学传染病研究所杭州310031 

出 版 物：《中国卫生检验杂志》 (Chinese Journal of Health Laboratory Technology)

年 卷 期：2005年第15卷第6期

页      码：663-665页

摘      要：目的:建立一种快速、特异、灵敏的实时荧光定量PCR方法用于检测白斑综合病毒DNA,为控制对虾白斑综合症提供科学依据。方法:根据GenBank登录的白斑综合病毒株序列,使用生物学软件进行序列对比,在白斑综合症病毒保守区序列设计引物和Tagman探针并进行筛选。对实时荧光定量PCR反应条件进行优化,提高了该方法的特异性、灵敏度和重现性等,并与标准方法(核酸探针点杂交)进行比对,对现场32份虾样进行了检测。结果:Tagman实时荧光定量PCR与标准方法的特异性符合率为100%,灵敏度超过标准方法的10000～100000倍,检测时间为标准方法的1/24,重现性良好(s=0.1～0.49,CV=0.78%～3.72%),并能准确定量。结论:本研究建立的Taqman实时荧光定量PCR方法用于白斑综合症病毒检测具有特异、灵敏、快速、定量、重现性好等优点。

主 题 词：实时荧光定量PCR Taqman 综合症 白斑 快速检测 荧光定量PCR方法 标准方法 病毒DNA 重现性 科学依据 设计引物 反应条件 核酸探针 检测时间 特异性 灵敏度 序列 病毒株 生物学 点杂交 符合率 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 1010[医学-医学技术类] 100215[100215] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1004-8685.2005.06.009

馆 藏 号：203140813...