奇异变形菌基因组文库的构建及标识序列的发现

作     者：赵瑾 陈泽良 王玉飞 乔凤 杜昕颖 张伶 黄留玉 ZHAO Jin;CHEN Ze-Liang;WANG Yu-Fei;QIAO Feng;DU Xin-Ying;ZHANG Ling;HUANG Liu-Yu

作者机构：军事医学科学院疾病预防控制所北京100071 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30600024) 

出 版 物：《军事医学科学院院刊》 (Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences)

年 卷 期：2008年第32卷第2期

页      码：126-128,143页

摘      要：目的：构建用于筛选奇异变形菌的特异序列的基因组文库，并从中筛选变形杆菌特异的标识序列。方法：提取奇异变形菌的基因组DNA，用Sau3AI部分酶切，回收酶切产物，然后与BamHI酶切的pUC19质粒连接，转化JM109，构建奇异变形菌的基因组文库。随机挑取抗性克隆，用位于质粒上的引物进行扩增，确定插入片段的大小及分布情况。DNA测序确定部分克隆中插入的序列，根据序列设计引物，分析这些序列在奇异变形菌临床分离株中的分布，验证序列的特异性。结果：成功构建了奇异变形菌的基因组文库，库容量达到1.1×10^5CFU。阳性克隆的比例为95％，插入片段大小主要分布在200～500bp的范围。对其中14个克隆进行了序列测定，其中5个片段与已知序列有一定的同源性，另外9个与已知序列没有同源性，特异性分析发现了几个较好的标识序列。结论：成功构建了奇异变形菌的基因组文库，利用该文库发现了奇异变形菌特异的序列。

主 题 词：变形杆菌,奇异 基因组文库 序列分析 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1674-9960.2008.02.006

馆 藏 号：203140952...