抗衰老蛋白Klotho阻断高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞TLR4／NF—κB p65／NGAL通路的激活及其作用机制

作     者：吴灿 吕川 周月宏 邵滢 秦宁宁 王秋月 Wu Can;Lyu Chuan;Zhou Yuehong;Shao Ying;Qin Ningning;Wang Qiuyue

作者机构：中国医科大学附属第一医院内分泌科沈阳110001 沈阳医学院附属中心医院内分泌科 辽宁省阜新市第二人民医院内分泌科 

基　　金：辽宁省科技攻关计划项目(项目编号2011225017) 沈阳市科技攻关计划项目(项目编号F11-262-9-06) 2011年辽宁省“百千万人才工程”资助项目 

出 版 物：《中华内分泌代谢杂志》 (Chinese Journal of Endocrinology and Metabolism)

年 卷 期：2015年第31卷第7期

页      码：611-617页

摘      要：目的探讨体外高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞（RMCs）中抗衰老蛋白Klotho及中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）两者表达水平的变化及其相关作用，同时观察Toll样受体-4（TLR4）／核因子-κB（NF—κB）p65通路在此过程中的作用。方法设计并合成针对NGAL基因的3个特异性siRNA序列转入RMCs，筛选抑制效率最佳的siRNA用于后续实验；以吡咯烷二硫基甲酸盐（PDTC）或Klotho重组蛋白干预体外高糖培养的RMCs；采用实时定量PCR检测Klotho、TLR4、NGALmRNA的表达，Western印迹检测Klotho、TLR4、NF—κB p65、NGAL、纤连蛋白、结缔组织生长因子（CTGF）的表达，ELISA检测单核细胞趋化因子-1（MCP-1）、趋化因子配体5（CXCL5）的分泌。结果高糖抑制Klotho表达（P〈0．05）并激活TLR4／NF—κB p65通路促进NGAL、纤连蛋白、CTGF、MCP-1、CXCL5表达，基因沉默NGAL表达后纤连蛋白、CTGF、MCP-1、CXCL5表达明湿下降（P〈0．01），PDTC干预后NGAL蛋白表达明显下降（P〈0．01），Klotho重组蛋白干预可抑制TLR4／NF-κB p65通路活性，下调NGAL、纤连蛋白、CTGF、MCP-1、CXCL5的表达（P〈0．01）。结论在RMCs中，Klotho可通过抑制高糖刺激的TLR4／NF—κB p65通路活性下调NGAL的表达．从而抑制纤连蛋白、CTGF、MCP-1、CXCL5的表达，可能对糖尿病肾脏组织起保护作用。

主 题 词：抗衰老酶 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白 Toll样受体-4 核因子-κB p65 糖尿病 肾脏疾病 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100210[100210] 100201[100201] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.1000-6699.2015.07.014

馆 藏 号：203141235...