抗转铁蛋白受体双价抗体的构建、表达及鉴定

作     者：肖代雯 朱慧芬 沈昕 邢薇 黄宇 雷萍 黄韬 王国斌 沈关心 XIAO Dai-Wen;ZHU Hui-Fen;SHEN Xin;XING Wei;HUANG Yu;LEI Ping;HUANG Tao;WANG Guo-Bin;SHEN Guan-Xin

作者机构：华中科技大学同济医学院 

基　　金："863"国家高新技术发展计划(2006AA02Z158) 教育部博士点专项资金(20060487024) 湖北省十一五重大科技攻关项目(2006AA301A05)资助 

出 版 物：《中国免疫学杂志》 (Chinese Journal of Immunology)

年 卷 期：2008年第24卷第1期

页      码：59-61页

摘      要：目的:抗转铁蛋白受体(TfR)双价抗体(bsFv)构建、表达及其与细胞结合的活性鉴定。方法:以抗TfR的单链抗体(scFv)为模板,设计引物引入中间连接肽(G4S)及酶切位点AscI,通过PCR方法扩增两条scFv片段,将其连接并克隆至原核表达载体pAB1,转化大肠杆菌TG1,阳性菌经IPTG诱导表达,FCM检测bsFv与K562,HepG2肿瘤细胞结合的活性及特异性。结果:酶切鉴定及DNA测序证明该bsFv构建成功;SDS-PAGE、Western blot鉴定表明表达蛋白分子量与bsFv理论值一致;FCM结果证明bsFv可与K562,HepG2肿瘤细胞特异性结合,且结合的阳性率较scFv有所提高。结论:成功构建了抗转TfR的bsFv,且能与K562,HepG2肿瘤细胞特异性结合。

主 题 词：转铁蛋白受体 单链抗体 双价抗体 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100102[100102] 10[医学] 

核心收录：

馆 藏 号：203142425...