CD226分子siRNA慢病毒载体的构建和鉴定

作     者：张圆 方亮 张春梅 金伯泉 庄然 ZHANG Yuan;FANG Liang;ZHANG Chun-mei;JIN Bo-quan;ZHUANG Ran

作者机构：第四军医大学免疫学教研室西安710032 

基　　金：国家自然科学基金课题(30801003)资助 

出 版 物：《科学技术与工程》 (Science Technology and Engineering)

年 卷 期：2010年第10卷第13期

页      码：3068-3071,3086页

摘      要：为设计筛选针对人CD226分子的siRNA序列,构建相应的siRNA慢病毒载体,检测其对Jurkat/E6细胞膜表面天然CD226分子表达水平的影响,首先设计并合成4对siRNA双链寡聚核苷酸,与CD226分子真核表达载体共同转染293T细胞,挑选出最有效抑制CD226表达的序列。应用基因工程技术,将该序列连接于慢病毒载体pLKO.1中,构建携带针对目的基因CD226的siRNA慢病毒载体。使用慢病毒包装质粒混合物和构建好的慢病毒载体共转染293T细胞,收集上清,感染Jurkat/E6细胞系,对病毒感染效果进行检测。结果在4条针对CD226分子设计的siRNA序列中,siRNA—513最为有效的抑制了外源性CD226分子的表达,带有该序列的慢病毒载体pLKO—CD226可以完全抑制Jurkat/E6细胞上天然分子的表达。说明应用基因工程技术成功构建了针对CD226分子的RNA干扰慢病毒载体,为深入研究人类黏附分子CD226在机体免疫功能方面提供了技术支持。

主 题 词：CD226 siRNA 慢病毒载体 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100102[100102] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1671-1815.2010.13.010

馆 藏 号：203142521...