重组福安泰-03融合蛋白表达条件的优化及其生物学活性检测

作     者：张永平 马润娣 于立坚 苏伟明 廖铭能 黄来珍 于廷曦 

作者机构：广东海洋大学海洋药物研究与开发重点实验室湛江524025 Cell Biology GroupDepartment of SurgeryDepartment of PathologyUniversity of Maryland School of Medicine and Baltimore Veterans Affairs Medical CenterBaltimoreMD 21201USA 

基　　金：国家科技部863计划海洋技术领域专题基金资助项目(2007AA092422) 国家自然科学基金资助项目(30271493) 广东省自然科学基金重点项目资助(021386) 广东省海洋与渔业局科技兴海重大项目资助(A200099B01) 

出 版 物：《生物医学工程学杂志》 (Journal of Biomedical Engineering)

年 卷 期：2012年第29卷第5期

页      码：923-928页

摘      要：福安泰-03(FAT-03)是从赤魟组织中分离得到,具有强抗血管生成活性的蛋白。本研究通过DNA重组技术获得了重组福安泰-03(rFAT-03)融合蛋白,运用响应面试验设计法优化表达条件,采用GST亲和柱分离纯化表达蛋白,比较分析不同培养时间、诱导剂浓度、诱导温度和诱导时间对可溶性融合蛋白表达量的影响。结果表明,当培养时间为6.13h、诱导温度为19.71℃、诱导剂(IPTG)浓度为0.36mmol/L、诱导时间为13.60h条件下可获得较好的表达效果,可溶性目的蛋白GST-rFAT-03的得率为7.57mg/L。对获得的rFAT-03生物活性检测显示,rFAT-03能明显抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管生成,且其效果与剂量相关。为后续对该蛋白的分离纯化和生物学功能研究奠定了基础。

主 题 词：GST/rFAT-03融合蛋白 可溶性融合蛋白 响应面设计法 表达条件 优化 生物活性 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

馆 藏 号：203142638...