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乙肝表面抗原和弓形虫棒状体分泌抗原多功能真核表达载体的构建与鉴定

乙肝表面抗原和弓形虫棒状体分泌抗原多功能真核表达载体的构建与鉴定

作     者:魏庆宽 肖婷 李瑾 马丽萍 王林 王英婷 闫运琴 高建丽 朱嵩 仲维霞 尹昆 付斌 张佃波 闫歌 黄炳成 

作者机构:山东省医学科学院山东省寄生虫病防治研究所山东省医学科学院寄生虫病分子免疫学重点实验室世界卫生组织淋巴丝虫病绦囊虫病合作中心济宁272033 济宁市第一人民医院 

基  金:山东省自然科学基金资助项目(编号:2009ZRC03083 2009ZRC03050) 山东省科技攻关项目(编号:2010GWZ20232) 济宁市科技发展计划项目(编号:济科2009-56-21) 

出 版 物:《中国临床新医学》 (CHINESE JOURNAL OF NEW CLINICAL MEDICINE)

年 卷 期:2013年第6卷第3期

页      码:191-195页

摘      要:目的探讨通过体外扩增乙肝表面抗原(HBsAg)基因,构建真核表达载体pcDNA3-HBsAg-ROP2的可行性。方法根据乙肝S基因序列及pcDNA3-p30-ROP2酶切位点等情况设计、合成引物,应用聚合酶链反应(PCR)技术,扩增HBsAg基因片段;应用回收、纯化、酶切、连接等技术,将HBsAg基因替换pcD-NA3-p30-ROP2中的p30基因,并进行酶切、PCR扩增及测序鉴定。结果 PCR扩增出约0.7 kb的目的基因HBsAg,成功构建pcDNA3-HBsAg-ROP2重组载体。PCR、酶切结果与理论相符,重组体包含了HBsAg和ROP2基因的完整序列。结论利用体外扩增乙肝表面抗原,可成功构建乙肝和弓形虫多功能重组载体pcDNA3-HBsAg-ROP2。

主 题 词:乙肝表面抗原(HBsAg) 弓形虫 棒状体分泌抗原2(ROP2) 真核表达载体pcDNA3 基因重组 

学科分类:1004[医学-公共卫生预防医学类] 100401[100401] 10[医学] 

D O I:10.3969/j.issn.1674-3806.2013.03.01

馆 藏 号:203142657...

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