嗜热内切-β-1,4-葡聚糖酶在毕赤酵母中的分泌表达

作     者：郑春阳 柳晓瑜 王巍 ZHENG Chun-yang;LIU Xiao-yu;WANG Wei

作者机构：天津强微特生物科技有限公司天津300384 

基　　金：天津市滨海新区科技小巨人成长计划-科技型企业创新发展(科技创业)项目(2010-BK130070) 科技型中小企业技术创新基金项目(11C26211203970) 天津市滨海新区重大科技项目(2011-BK120014) 天津市科技计划项目(12ZCZDSY01800) 

出 版 物：《天津理工大学学报》 (Journal of Tianjin University of Technology)

年 卷 期：2013年第29卷第4期

页      码：47-50页

摘      要：首先通过引物设计扩增嗜热内切-β-1,4-葡聚糖酶基因,然后采用Not I和Xho I双酶切目的基因与载体pPICZα-A,通过T4连接酶连接后转化DH5α菌株,挑取阳性克隆进行测序,测序正确阳性克隆放大培养,大量提取质粒,并采用限制性内切酶Sac I线性化质粒,电转化感受态酵母细胞,经培养后挑选转化子分别对应点种到MM、MD平板,并利用ZeocinTM获得多拷贝重组子,最后经甲醇诱导,并于48、54 h取样,经SDS-PAGE分析,结果表明整合嗜热内切-β-1,4-葡聚糖酶的毕赤酶母工程菌株构建成功.

主 题 词：毕赤酵母 内切-β-1, 4-葡聚糖酶 分泌表达 双酶切 甲醇诱导 

学科分类：08[工学] 082203[082203] 0822[工学-核工程类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-095X.2013.04.010

馆 藏 号：203142676...