幽门螺杆菌尿素酶C基因的克隆及测序

作     者：徐俊荣 张沥 闰小君 崔大样 江红 韩锋产 

作者机构：中国人民解放军第四军医大学基因诊断研究所陕西省西安市710033 西安市中心医院消化内科陕西省西安市710003 

出 版 物：《世界华人消化杂志》 (World Chinese Journal of Digestology)

年 卷 期：2001年第9卷第3期

页      码：308-311页

摘      要：目的用PCR方法扩增幽门螺杆菌(Hp)尿素酶C基因,以构建Hp UreC基因的重组克隆,为进一步表达Hp UreC基因的重组蛋白质并研究其功能奠定基础。方法以Hp临床菌株总DNA为模板,根据已发表的HpUreC基因序列设计引物(位于588bp～605bp和1737bp～1754bp),采用PCR方法扩增出一个1173bp的Hp尿素酶C基因片段,用BamHⅠ及EcoRⅠ双酶切后将其克隆入测序质粒pGEM-3Zf(-)中,以全自动测序仪双向测定目的片段序列,借助于DNA TOOL 5.1拼接成完整序列,与已知的Hp UreC基因序列做比较。结果所得核酸序列与报道的Hp国际标准菌株M60398的UreC基因同源性为95％,根据测序结果推断其编码的氨基酸序列,并行BLAST分析,发现它与标准菌株M60398的氨基酸序列同源性为97％。结论成功构建了Hp UreC基因的重组克隆,为进一步研究表达Hp UreC基因的重组蛋白质并研究其功能奠定了基础。

主 题 词：尿素酶 遗传学 幽门螺杆菌 酶学 分离 提纯 聚合酶链反应 胃肠道疾病 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1009-3079.2001.03.014

馆 藏 号：203142713...