猪圆环病毒1型real-time PCR检测方法的建立

作     者：于红欣 王立娇 孟凡伟 王俊 周双海 YU Hong-xin;WANG Li-jiao;MENG Fan-wei;WANG Jun;ZHOU Shuang-hai

作者机构：北京农学院动物科学技术学院北京102206 

基　　金：北京市属高等学校高层次人才引进与培养计划项目(CIT&TCD201304092) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2014年第44卷第10期

页      码：1036-1041页

摘      要：为了建立一种定量检测猪圆环病毒1型(PCV1)的实时荧光定量PCR方法,根据PCV1基因序列设计了1对特异性引物,并构建含有PCV1基因片段的重组质粒,以系列稀释后的重组质粒作为模板建立了定量检测PCV1的SYBR GreenⅠreal-time PCR方法,并绘制标准曲线,进行特异性、敏感性和重复性试验。结果显示,该方法的标准曲线的决定系数为0.999,显示出优良的线性关系;最低可准确检测320copies/μL的核酸模板,重复性试验的变异系数小于2%;该方法对PCV2、猪细小病毒、伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒及猪瘟病毒等的检测结果均为阴性;对临床样品的检出率高于常规PCR方法。结果表明,建立的real-time PCR特异性强、灵敏度高、重复性好,可用于PCV1的检测与定量分析。

主 题 词：猪圆环病毒1型 SYBR GreenⅠ real-time PCR 定量检测 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.16656/j.issn.1673-4696.2014.10.005

馆 藏 号：203142848...