B型禽偏肺病毒TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立及应用

作     者：沈海强 车艳杰 宋新宇 高冉 付旭彬 金天明 SHEN Haiqiang;CHE Yanjie;SONG Xinyu;GAO Ran;FU Xubin;JIN Tianming

作者机构：天津农学院动物科学与动物医学学院天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室天津300392 天津瑞普生物技术股份有限公司天津300308 

出 版 物：《中国家禽》 (China Poultry)

年 卷 期：2024年第46卷第9期

页      码：121-127页

摘      要：试验旨在开发一种特异性检测B亚型禽偏肺病毒(aMPV-B)的方法。研究参照GenBank中的aMPV-G基因序列设计一对特异性引物,建立aMPV-B TaqMan荧光定量PCR方法,优化该方法的反应条件,建立标准曲线,进行特异性、重复性和敏感性试验,并将该方法用于临床样品的检测。结果显示:建立的TaqMan荧光定量PCR方法只能检测出B亚型aMPV,其敏感性能达到1.34×10^(1) copies/µL,斜率为-3.346,截距为40.01,相关系数(R2)为1.00,循环阈值(Ct)与模板拷贝数之间呈现良好的相关性;临床样品检测结果显示,该方法检测出18份样品阳性,而普通PCR仅检测出10份阳性。综上所述,建立的aMPV-B TaqMan荧光定量PCR方法在样品检测中表现出良好的特异性和较高的敏感性,适用于临床样品的aMPV-B检测。

主 题 词：B型禽偏肺病毒 G基因 实时荧光定量PCR TapMan荧光探针 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16372/j.issn.1004-6364.2024.09.016

馆 藏 号：203143219...