基于酶介导双重指数扩增检测技术的白壳快速检测方法

作     者：俞紫琳 张慧丽 顾建锋 吴尧 胡振新 李秋实 段维军 YU Zilin;ZHANG Huili;GU Jianfeng;WU Yao;HU Zhenxin;LI Qiushi;DUAN Weijun

作者机构：宁波检验检疫科学技术研究院浙江宁波315012 宁波中盛产品检测有限公司浙江宁波315012 宁波海关技术中心浙江宁波315012 苏州晶睿生物科技有限公司江苏苏州215000 

基　　金：国家重点研发计划(2022YFF0608804) 海关总署科研项目(2022HK011) 宁波市社会公益科研项目(2022S010) 

出 版 物：《菌物学报》 (Mycosystema)

年 卷 期：2024年第43卷第9期

页      码：105-113页

摘      要：可可花瘿病致病菌白壳Albonectria rigidiuscula是我国进境植物检疫性有害生物,已在多个口岸植物入境产品中被截获,存在较大生物入侵风险。为探索口岸适用的现场快速检测技术,根据白壳翻译延长因子TEF1-α的基因序列,基于酶介导双重指数扩增核酸检测技术设计了针对白壳的5条DNA上游引物、6条DNA下游引物和4条RNA探针。通过筛选,获得了扩增效果最佳的上、下游DNA引物和RNA探针组合。灵敏度实验结果表明,其最低检测限量可达0.5 pg/uL。实际样品检测结果表明,该方法适用于口岸疑似携带有白壳样品的检测与初筛。该方法具有操作简便、耗时较短、特异性强等优点,整个反应过程仅需30 min,检测过程完全闭管且不需要PCR后续处理,为口岸现场白壳检测筛查提供了重要参考。

主 题 词：外来物种 生物安全 植物病害 检疫 检测 

学科分类：09[农学] 0904[农学-动物医学类] 

核心收录：

D　O　I：10.13346/j.mycosystema.240169

馆 藏 号：203143370...