SYBR GreenⅠ染料-实时荧光定量聚合酶链式反应法检测发酵乳中的霉菌和酵母含量

作     者：张捷 李献 张瑞 刘雨蒙 明若阳 陈佳 周巍 ZHANG Jie;LI Xian;ZHANG Rui;LIU Yu-Meng;MING Ruo-Yang;CHEN Jia;ZHOU Wei

作者机构：河北省食品安全重点实验室国家市场监督管理总局重点实验室(特殊食品监管技术)特殊食品安全与健康河北省工程研究中心河北省食品检验研究院石家庄050227 石家庄学院化工学院石家庄050035 

基　　金：河北省市场监管局科技计划项目(2023ZD20) 河北省高等学校科学技术研究项目(ZC2023112) 国家市场监督管理总局科技创新人才计划项目(QNBJ202323) 

出 版 物：《食品安全质量检测学报》 (Journal of Food Safety and Quality)

年 卷 期：2024年第15卷第16期

页      码：31-38页

摘      要：目的建立一种应用SYBR GreenⅠ染料的实时荧光定量聚合酶链式反应法快速检测发酵乳中的霉菌和酵母菌。方法本研究针对霉菌与酵母菌的保守序列设计引物,确定最优反应体系与反应条件。通过熔解曲线以及非目标菌株的检测验证该方法的特异性;通过菌悬液的梯度稀释检测确定该方法的灵敏度;通过菌悬液与发酵乳样品混合后进行检测,确定该方法的检出限,并得到标准曲线。结果该方法能够特异性的检测发酵乳中的霉菌、酵母菌,无交叉反应。该方法检测霉菌、酵母菌的灵敏度均为10^(2) CFU/mL,并且当菌悬液与发酵乳样品混合后,并没有降低该方法的检出限。在10^(2)~10^(6) CFU/mL浓度范围内,菌液浓度的对数值与循环阈值(cyclethreshold,Ct)具有良好的线性关系,可以在市售样品的检测中通过Ct值计算样品中目标菌的含量,更快的判断发酵乳是否被霉菌、酵母菌污染。结论该方法可用于发酵乳中霉菌和酵母菌的快速检测,为发酵乳的食品安全提供了技术保障。

主 题 词：霉菌 酵母 SYBR GreenⅠ染料 检测 实时荧光定量聚合酶链式反应 发酵乳 

学科分类：081704[081704] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 070302[070302] 0703[理学-化学类] 0836[0836] 082203[082203] 0822[工学-核工程类] 

D　O　I：10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.20240629002

馆 藏 号：203143378...