C5orf34基因过表达慢病毒载体的构建及鉴定

作     者：阳梦 郭菲菲 赵静 李芳 吕爱霞 何丹 YANG Meng;GUO Feifei;ZHAO Jing;LI Fang;LV Aixia;HE Dan

作者机构：新疆医科大学附属肿瘤医院胸外科乌鲁木齐830011 

基　　金：新疆维吾尔自治区自然科学基金(项目编号:2022D01C293) 

出 版 物：《新疆医学》 (Xinjiang Medical Journal)

年 卷 期：2024年第54卷第6期

页      码：655-659页

摘      要：目的构建C5orf34基因的过表达慢病毒载体。方法通过聚合酶链反应(PCR)选择性扩增C5orf34基因目的片段,将目的片段连接至载体,利用基因重组技术构建带有C5orf34基因目的片段的重组载体,将重组载体转化到感受态细胞扩增并对阳性克隆的C5orf34过表达慢病毒载体进行测序,将正确重组的过表达慢病毒载体包装并转染色至293T细胞进行后续的慢病毒转染和滴度测定,采用实时定量PCR法检测C5orf34基因的过表达水平。结果经过测序比对显示,慢病毒载体与设计参考序列一致。重组慢病毒经包装并转染293T细胞后可观察到荧光,显示C5orf34过表达慢病毒载体滴度为1.0×10^(8)TU/mL。实时定量PCR的结果显示,在稳定转染C5orf34基因的细胞中C5orf34基因表达水平明显增高。结论成功构建C5orf34基因过表达慢病毒载体,为进一步研究C5orf34基因在肺癌发生发展过程中的机制奠定了生物学基础。

主 题 词：C5orf34 慢病毒表达载体 非小细胞肺癌 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1002[医学-临床医学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 100214[100214] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 10[医学] 

馆 藏 号：203143380...