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牛结节性皮肤病病毒与山羊痘病毒双重TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立

牛结节性皮肤病病毒与山羊痘病毒双重TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立

作     者:余翰维 冯秋媛 苏洋 张慧 邵晓龙 杨云凤 何小兵 陈国华 房永祥 景志忠 陈轶霞 YU Hanwei;FENG Qiuyuan;SU Yang;ZHANG Hui;SHAO Xiaolong;YANG Yunfeng;HE Xiaobing;CHEN Guohua;FANG Yongxiang;JING Zhizhong;CHEN Yixia

作者机构:西北民族大学生命科学与工程学院 中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室 

基  金:国家自然科学基金项目(32260874) 国家动物疫病监测与流行病学调查计划项目(125161031) 家畜疫病病原生物学国家重点实验室(应用)基础重大成果培育项目(SKLVEB2021CGQD03) 甘肃省科技计划项目(22JR5RA780) 

出 版 物:《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期:2024年第54卷第9期

页      码:1188-1194页

摘      要:为建立可快速鉴别牛结节性皮肤病病毒(LSDV)与山羊痘病毒(GTPV)的方法,通过对GenBank中公布的LSDV和GTPV的全基因序列进行比对分析,靶向LSDV基因组的保守区域设计了1对特异性的引物和2条TaqMan探针,经反应条件优化后,建立了一种LSDV和GTPV的双重TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,并评估其敏感性、重复性、特异性。结果表明,本方法能从LSDV、GTPV、绵羊痘病毒、羊口疮病毒、牛病毒性腹泻病毒、口蹄疫病毒6种常见的牛源性疾病病原中成功鉴别LSDV和GTPV,具有良好的特异性。LSDV和GTPV基因组的最低检测下限都为3.37×10~1copies/μL。组内、组间变异系数均小于1%。运用本方法对10份临床样品进行检测,符合率达到100%。综上所述,本方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可快速鉴别出样品中的LSDV和GTPV,解决了目前国内容易造成的牛结节性皮肤病漏诊的问题,为全面控制国内牛结节性皮肤病疫情提供了新的技术手段。

主 题 词:牛结节性皮肤病病毒 山羊痘病毒 双重TaqMan实时定量PCR 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录:

D O I:10.16656/j.issn.1673-4696.2024.0157

馆 藏 号:203143381...

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