赤羽病病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

作     者：李超 王素春 隋金钰 潘俊慧 魏世萌 祁倩 周凯钰太 王楷宬 Li Chao;Wang Suchum;Sui Jinyu;Pan Jumhui;Wei Shimeng;Qi Qian;Zhou Kaiyutai;Wang Kaicheng

作者机构：中国动物卫生与流行病学中心农业农村部动物生物安全风险预警及防控重点实验室(南方)青岛市动物生物安全重点实验室山东青岛266032 

基　　金：国家重点研发计划项目(2021YFD1800500) 

出 版 物：《中国动物检疫》 (China Animal Health Inspection)

年 卷 期：2024年第41卷第9期

页      码：111-117页

摘      要：为建立一种快速、灵敏的赤羽病病毒(Akabanediseasevirus,AKAV)核酸检测方法,以AKAV S基因为靶基因,设计特异性引物和Taq Man探针,通过优化反应体系和条件,建立了AKAV荧光定量RT-PCR检测方法,随后开展了敏感性、特异性及重复性评估,并利用该方法与AKAV检疫行业标准推荐方法同时对临床采集的80份牛羊血液样品进行检测,以检验方法的临床应用效果。结果显示:本研究建立的检测方法敏感性较高,最低检测限为13.4 copies/μL;特异性良好,与口蹄疫病毒、牛冠状病毒、牛结节性皮肤病病毒、牛病毒性腹泻病毒、传染性牛鼻气管炎病毒、蓝舌病病毒、牛白血病病毒等均无交叉反应;组内试验变异系数为0.93%~2.47%,组间试验为1.25%~2.76%,重复性良好;利用建立的方法从80份临床样品中检出AKAV阳性样品21份,该检测结果与AKAV检疫行业标准推荐方法的符合率为98.75%。结果表明,本研究建立的AKAV荧光定量RT-PCR检测方法敏感性高,特异性及重复性好,适用于赤羽病临床检测,为赤羽病病原学监测和诊断技术标准开发提供了技术支撑。

主 题 词：赤羽病病毒 实时荧光定量RT-PCR 方法建立 初步应用 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-944X.2024.09.020

馆 藏 号：203143384...