Ki-67启动子内Sp1位点与Hela细胞核蛋白结合活性

作     者：李中林 钱国伟 徐为 李望 李圆 张宝福 陈菲菲 田卉 章龙珍 郑骏年 LI Zhong-lin;QIAN Guo-wei;XU Wei;LI Wang;LI Yuan;ZHANG Bao-fu;CHEN Fei-fei;TIAN Hui;ZHANG Long-zhen;ZHEN Jun-nian

作者机构：徐州医学院附属医院神经外科江苏221002 徐州医学院肿瘤生物治疗实验室 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30972976) 

出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期：2010年第27卷第8期

页      码：1116-1118页

摘      要：目的 观察Ki-67启动子内能与细胞核蛋白结合的转录因子Sp1结合位点,探讨肿瘤细胞Ki-67基因高表达机制.方法 提取Hela细胞核蛋白.针对Ki-67启动子内4个潜在Sp1位点区域A1（-198～-172）、A2（-170～-144）、A3（-63～-37）、A4（-14～＋12）,以及没有Sp1结合位点的阴性对照区域C（-117～-91）,设计相应的Sp1一致性寡核苷酸探针和Sp1突变性寡核苷酸探针,凝胶阻滞电泳实验（EMSA）验证Sp1探针与Hela细胞核蛋白的结合活性.结果 EMSA显示A2、A3、A4一致性探针均可以和Hela细胞核蛋白结合,这种结合可以被相应的100倍浓度非标记的一致性探针竞争抑制,不能被100倍浓度的非标记的突变性探针所抑制.出现结合带的反应中加入Sp1抗体后观察到明显的Supershift现象.A1和C相应探针不能和Hela细胞核蛋白发生结合反应.结论 Ki-67启动子-170～-144、-63～-37和-14～＋12区域上存在能与肿瘤Hela细胞核蛋白结合的Sp1结合位点.

主 题 词：肿瘤细胞 Ki-67 转录因子Sp1 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2010.08.037

馆 藏 号：203144066...