巴夫杜氏藻GAPDH基因部分序列的克隆

作     者：尚常花 朱顺妮 袁振宏 王忠铭 SHANG Chang-hua;ZHU Shun-ni;YUAN Zhen-hong;WANG Zhong-ming

作者机构：中国科学院广州能源研究所/可再生能源与天然气水合物重点实验室广东广州510640 

基　　金：广东省中国科学院全面战略合作项目(2010A090100010) 科技部"十二五"支撑计划项目(2011BAD14B03) 中国科学院可再生能源与天然气水合物重点实验室基金(y107j6) 

出 版 物：《广东农业科学》 (Guangdong Agricultural Sciences)

年 卷 期：2011年第38卷第13期

页      码：126-127,134页

摘      要：3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)是糖酵解途径中的一个关键酶,由于其基因表达量相对恒定,因此在定量和半定量PCR试验中常被用作内源参照基因来确定目标基因的相对表达量。从巴夫杜氏藻(Dunaliella parva)中克隆GAPDH基因,并对基因序列进行了分析。以巴夫杜氏藻cDNA为模板,根据GAPDH的保守序列设计引物,PCR扩增获得了673 bp的cDNA序列。在此基础上,采用cDNA末端快速扩增(RACE)技术,获得了913 bp的3′-cDNA序列,进而获得了cDNA部分序列1 393 bp。序列分析结果表明:巴夫杜氏藻GAPDH cDNA部分序列包括1 055 bp的编码区和338 bp的3′非翻译区。该基因的克隆为半定量和定量PCR等技术在巴夫杜氏藻分子生物学研究中的应用提供了内源参照基因。

主 题 词：巴夫杜氏藻 GAPDH基因 克隆 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 071001[071001] 07[理学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1004-874X.2011.13.042

馆 藏 号：203144107...